Отправить сообщение:
  • Файл отправлен!
  • Технология оздоровления и ускоренного размножения картофеля

    2015-01-28 17:38:05 Опубликовано: 28 января 2015 г. в 17:38

    ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ

    «КЕМЕРОВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ

    СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА»

    (ФГБНУ «Кемеровский НИИСХ»)

     

     

    Технология оздоровления и ускоренного размножения картофеля

     

     

    Методическое пособие

     

    Кемерово 2014

     

     

    УДК 635.21.632.38.631.53.01

    Лапшинов Н.А. Технология оздоровления и ускоренного размножения картофеля (методическое  пособие) / Н.А. Лапшинов, В. И. Куликова, Т. В. Рябцева и др.; ФГБНУ «Кемеровский НИИСХ». — Кемерово, 2014. - 44 с.

     

    Авторы:

     

    Н.А. Лапшинов

    д.с.-х.н., доцент, директор

    В.И. Куликова 

    к.с.-х.н., доцент, заведующая отделом селекции и

    семеноводства картофеля

    Т.В. Рябцева

    к.с.-х.н., заведующая лабораторией биотехнологии и                                    оздоровления картофеля

    В.П. Ходаева

    заведующая лабораторией первичного семеноводства картофеля

    Л.С. Аношкина

    к.с.-х.н., доцент, заведующая лабораторией селекции картофеля

     

     

    Материалы одобрены Ученым советом ФГБНУ «Кемеровский НИИСХ» и рекомендованы к печати (протокол № 3 от 10.11. 2014г.)

     

    Редакционная коллегия:

    В.Н. Пакуль д.с.-х.н., заместитель директора по научной работе

    О.А. Исачкова к.с.-х.н., ученый секретарь

     

    Обобщен материал по оздоровлению и ускоренному размножению картофеля в культуре in vitro; выращиванию исходного материала картофеля в оборудованных помещениях, теплице и полевых условиях  в процессе оригинального семеноводства картофеля.

    Материалы предназначены для специалистов сельского хозяйства, преподавателей и студентов сельскохозяйственных учебных заведений, огородников – любителей.

     

     

    Введение

    Каждый сорт картофеля, выходящий из селекционного учреждения и не подвергшийся оздоровлению, является носителем вирусных и бактериальных инфекций, стойко передающихся клоновому потомству. Различные виды отбора, в том числе клоновый, не могут освободить исходный материал от них, так как, во-первых, некоторые мозаичные вирусы часто содержатся во всех растениях, во-вторых, вирусные и бактериальные инфекции могут находиться в растениях и клубнях картофеля в скрытом состоянии, трудно обнаружимом не только по визуальным признакам, но и специальными методами диагностики.

    Фитопатогенные вирусы – это возбудители, которые в отличие от микроорганизмов не имеют обмена веществ. Они способны размножаться и расселяться в организме  растения снижая качество столового картофеля и урожай на 15-40 %.

    Освобождение семенного картофеля от вирусных инфекций, защита его от других болезней, сохранение репродуктивных свойств сортов обеспечивается системой безвирусного семеноводства картофеля. Основная задача системы семеноводства – получение оздоровленного безвирусного материала его ускоренное размножение и включение в процесс репродуцирования.

    Основным способом оздоровления картофеля от вирусной инфекции является метод культуры тканей, но когда оздоровление от вирусов применяя только метод культуры ткани оказывается невозможным, метод апикальных меристем сочетают с химиотерапией, которая предусматривает использование веществ, обладающих антивирусными свойствами.

    Для получения первой клубневой репродукции после оздоровления растения, выращенные в пробирках на питательной среде, высаживают в почву в теплице или вегетационном домике, где они требуют тщательного ухода. В закрытом грунте могут применяться методы размножения верхушками стеблей и черенками. Клубни, полученные в защищенном грунте, высаживают в полевом питомнике, где отбирают лучшие растения-клонообразователи. Их урожай убирают в бумажные или пленочные пакеты отдельно от каждого куста. Далее работа ведется по существующей методике первичного семеноводства картофеля.

    Описанная общая схема оздоровления картофеля непрерывно развивается и совершенствуется. Так, например, в некоторых лабораториях стерилизацию материала и перевод его в стерильную культуру на питательной среде проводят в начале работы, термообработке подвергают растения в пробирках, а ингибиторы вирусов добавляют в питательную среду. Применение высокоэффективных синтетических ингибиторов вирусов дает возможность выделять эксплантаты до 0,5 мм (которые практически уже не являются меристемой) и тем самым снижать процент отхода и сокращать сроки регенерации растений. Учёными ФГБНУ «Кемеровский НИИСХ» на основе применения наиболее эффективных способов и приемов отработана технология оздоровления и ускоренного размножения картофеля, которая существенным образом отличается от применяемых, позволяет ежегодно получать 10-15 тысяч рассадных растений картофеля, свободных от вирусных и бактериальных болезней и 40-100 тысяч оздоровленных исходных клубней. При выращивании оригинального семенного картофеля диагностика вирусов и бактериозов на всех этапах оздоровления, микроклонального размножения, размножение в теплице и поле имеет первостепенное значение. В настоящее время разработано достаточно много методов для диагностики патогенов картофеля, одним из наиболее эффективных является иммуноферментный анализ (ИФА).

    Технологическая схема оздоровления и ускоренного размножения картофеля на основе биотехнологических приемов

    Применяемая в настоящее время технология оздоровления и ускоренного размножения сортов картофеля – составная часть системы оригинального семеноводства картофеля, включает следующие этапы:

    - отбор базовых клонов;

    - подготовка клубней для вычленения верхушечных меристем;

    - проверка  исходной зараженности клубней методом ИФА;

    - термотерапия;

    - проращивание;

    - вычленение меристем;

    - выращивание растений из меристем в пробирках на искусственной питательной среде;

    - микроклональное размножение;

    - диагностика микрорастений на наличие вирусной инфекции методом ИФА;

    - маркировка безвирусных растений в культуре in vitro как родоначальников меристемных линий;

    - дополнительное оздоровление растений регенерантов, полученных при оздоровлении методом апикальной меристемы в сочетании с термотерапией, имеющих положительную реакцию на вирусы, с применением ингибиторов вирусов;

    - диагностика микрорастений оздоровленных с применением ингибиторов вирусов на выявление скрытой вирусной инфекции методом ИФА;

    - ускоренное размножение методом микроклонального черенкования в культуре in vitro;

    - применение методов ускоренного размножения растений in vitro на торфяном субстрате с добавлением вермикулита, выращивание рассадных растений с ограниченной площадью питания (укоренение верхушек и пазушных побегов, ростковых черенков и др.);

    - пересадка растений из пробирок, торфяного субстрата в грунт для получения исходных клубней.

     

    1 Оздоровление картофеля методом апикальной меристемы

    Оздоровление картофеля – сложный комплексный процесс, сочетающий использование, как полевых, так и лабораторных методов.

     

    1.1 Отбор базовых клонов

    Для оздоровления сортов и гибридов картофеля ведется поиск базовых клонов в полевых условиях. В период бутонизации и начале цветения визуальной оценке подвергается индивидуально каждое растение, дополнительно каждое из визуально отобранных растений проверяют на наличие патогенов методом ИФА по листовым пробам.

    Требования, предъявляемые к растению, намеченному к отбору:

    Растение – типичное по морфологическому строению для  данного сорта, абсолютно здоровое по внешнему виду, нормально развитое, с характерным для сорта количеством стеблей.

    Клубни типичные по морфологическим признакам для данного сорта без признаков веретеновидности, совершенно здоровые по визуальной оценке, характерное для сорта количество стандартных по размеру клубней и переход от крупных к мелким.

    Урожай каждого отобранного клона помещают в отдельный пакет и закладывают на хранение. После прекращения периода покоя проводят термотерапию.

     

    1.2 Термотерапия

    Впервые метод термотерапии для оздоровления клубней картофеля от вируса скручивания листьев был применен в Англии Б. Кассанисом [1].

    Термотерапия, то есть тепловая обработка клубней, проводимая в термостате при температуре +370С, в течение 40 дней, позволяет подавить развитие сферических вирусов (вирус желтой карликовости картофеля, вирус скручивания листьев картофеля), в тоже время способствует повышению эффективности метода верхушечных меристем при оздоровлении от вирусов XBK, SBK, МВК, PLRV, YBK, ABK. Клубни, помещаемые на термотерапию, должны быть свободны от инфекции, фитофтороза, склероциев ризоктонии и тщательно вымыты.

     

    1.3 Проращивание

    После термотерапии клубни проращивают для получения этилированных ростков размером 2-3 см. Концентрация вирусов в этилированных ростках значительно ниже и, вероятно, зона верхушечной меристемы больше, чем в ростках, выросших на свету. Клубни помещают в кюветы на стеллажах  в темном месте, при температуре 18-220С и относительной влажности воздуха в пределах 75 %.

    Продолжительность периода проращивания различна и  зависит от сортовых особенностей. Для получения этилированных ростков 2-3 см у сортов Невский и Кузнечанка требуется 30 дней, Любава и Тулеевский 60 дней.

     

    1.4 Вычленение верхушечных меристем

    Эффективность оздоровления зависит от уровня подготовки специалиста, сортовых особенностей, исходной зараженности сорта вирусами, размера вычленяемых эксплантов. Каждый вирус имеет свой уровень, то есть, расположен в растениях на определенном расстоянии от терминальных клеток. Наибольшая зона верхушечных меристем, свободная от вирусной инфекции, чрезвычайно мала 0,1-0,3 мм. Самая большая зона свободна от вирусов АВК, YВК, ВСЛК; меньшая от ХВК, МВК, SВК. Получение зоны маленьких размеров ведет к трудностям регенерации меристем. Апикальные участки больших размеров содержат дифференцированные ткани и являются эксплантами верхушечных побегов. Культивирование верхушечных эксплантов в условиях in vitro, по сравнению с культурой меристемы, повышает приживаемость регенерантов и сокращает сроки регенерации, но не способствует освобождению от вирусной инфекции [2].

    При оздоровлении картофеля  применяют  питательную среду для выращивания меристем. В качестве основных ингредиентов питательных сред используют макро- и микросоли, витамины, органические вещества, регуляторы роста. Минеральный состав питательных сред должен обеспечивать сбалансированное и достаточное снабжение меристем необходимыми элементами питания. Для роста картофельных эксплантов оптимальная реакция среды рН 5,7 [3].

    Вычленение верхушечных меристем проводят в стерилизованном, с помощью ртутно-кварцевых или бактерицидных ламп микробиологическом боксе. Перед началом работы рабочее место (стол, бинокулярный микроскопом) и штативы для пробирок протирают 96 %-ным этиловым спиртом. Инструменты, используемые для вычленения (пинцеты, скальпели, иглы), стерилизуют перед каждым вычленением, погружая в спирт с последующим обжигом.

    Ростки перед вычленением меристем стерилизуют в 96 %-ном этиловом спирте. Ростки помещают в химический стакан, наливают спирт и стерилизуют в течение 5-ти минут, затем трижды промывают в стерильной дистиллированной воде. Дезинфицированные ростки перекладывают в стерильную чашку Петри и добавляют несколько капель автоклавированной воды для предупреждения их подсыхания.

    С верхушки ростка удаляют верхние покровные листочки под бинокулярным микроскопом при 30-50-кратном увеличении. Меристему, включающую кусочек ткани размером 100-300 мкм без листовых зачатков (примордиев), вычленяют кусочком тонкого лезвия зажатого в цанговый держатель (рисунок 1). Каждую операцию по удалению листочков и вычленению меристемы проводят отдельным простерилизованным инструментом.

     

        

    Рисунок 1 – Вычленение меристемы из ростков и посадка на питательную среду

    После вычленения меристему иглой аккуратно переносят на поверхность питательной среды в пробирку. Затем пробирку закрывают пробкой над пламенем горелки и ставят в штатив. Во избежание подсыхания питательной среды пробку заворачивают специальной пленкой.

    Пробирку с посаженной на питательную среду меристемой переносят в специальную комнату с постоянным световым и влаготемпературным режимами. Температуру необходимо поддерживать 20-240С, освещенность 8 ± 2 тыс. люкс, фотопериод 16 часов, влажность 70 %. Важное условие хорошей регенерации растений из меристем – сокращение периода между их выделением и помещением в комнату с постоянным режимом.

    В течение периода регенерации проростки из меристем пересаживают в микробиологическом боксе на новую порцию питательной среды такого же состава через 25-28 дней до получения растения с 5-6 листочками, затем его расчеренковывают. Первый черенок высаживают в пробирки на питательную среду, оставшуюся часть растения диагностируют методом ИФА. Растения регенеранты, свободные от вирусной инфекции получают условные обозначения и их размножают черенкованием in vitro.

    За период с 2011 г. по 2014 г. по такой технологии оздоровлено 23 сорта картофеля. Период роста меристем различается по сортам. Время от вычленения до получения настоящего растения с развитой корневой системой и 5-6-ю листочками составляет от 35 до 150 дней.

     

    1.5 Метод апикальной меристемы в сочетании с химиотерапией

    Для более эффективного оздоровления вновь созданных сортов картофеля и быстрого включения их в процесс размножения метод апикальной меристемы сочетают с химиотерапией. Данное сочетание основано на добавлении в питательную среду веществ ингибиторов вирусов: виразола, хитозана, интерферона и других [4].

    Метод апикальных меристем в сочетании с химиотерапией позволяет оздоровить от вирусной инфекции растения регенеранты в культуре in vitro, полученные при оздоровлении методом апикальной меристемы в сочетании с термотерапией и имеющих положительную реакцию на вирусы по результатам ИФА, а также меристем взятых с клубня растения, пораженного вирусами в латентной форме. Последнее  имеет особое значение при оздоровлении селекционных линий и гибридного материала.

    Характеристика ингибиторов вирусов

    Виразол (синтетический аналог РНК-азы) – 1-β-D-рибофуранозил-1Н-1,2,4-триазол-3-карбоксамид, противовирусное средство. Синтетический аналог нуклеозидов с противовирусным действием. Обладает широким спектром активности против различных ДНК и РНК вирусов. Виразол ингибирует репликацию новых вирионов, что обеспечивает снижение вирусной нагрузки. Виразол селективно ингибирует синтез вирусной РНК, не подавляя синтез РНК в нормально функционирующих клетках.

    Хитозан – аминосахарид, производное линейного полисахарида, макромо-лекулы состоят из случайно-связанных β-(1-4) D-глюкозаминовых звеньев и N-ацетил-D-глюкозамин. Один из источников получения хитозана - панцири ракообразных. Хитозан обладает антибактериальными, противогрибковыми и антивирусными свойствами. Для хитозана также характерны мукоадгезивные свойства, то есть способность к прилипанию к слизистым оболочкам.

    Интерферон – является одним из основных эндогенных (вырабатываемых в организме) факторов, препятствующих поражению организма вирусной инфекцией. Кроме того, продукт обладает иммуностимулирующей (повышающей защитные силы организма) активностью.

    Ингибиторы вирусов виразол, хитозан, интерферон добавляют в питательную среду для выращивания меристем в концентрации: 0,1 %, 0,05 %, 0,01 %, как в чистом виде, так и в сочетании препаратов. Ингибиторы вирусов растворяют в бидистилированной воде, добавляя по 0,5 мл в пробирки с теплой питательной средой (5 мл), затем автоклавируют.

    Всю последовательность операций по вычленению меристем проводят аналогично пункту 1.4.

    В наших исследованиях применение ингибиторов вирусов оказало стимулирующее действие на морфогенез растений и выход регенерантов. При этом эффективность оздоровления существенно увеличилась. Приживаемость меристем на питательной среде с добавлением ингибиторов вирусов повышалась в зависимости от сорта на 25-33 %.

    При оздоровлении картофеля методом апикальной меристемы в сочетании с химиотерапией установлены оптимальные концентрации ингибиторов вирусов для регенерации меристем сортов: Тулеевский – 0,1 % (хитозан), Удалец – 0,1 % (виразол), Любава – 0,1 %; 0,01 % (интерферон) [5].

    Растения регенеранты в культуре in vitro, полученные при оздоровлении методом апикальной меристемы в сочетании с термотерапией, имеющие положительную реакцию на вирусы по результатам ИФА сортов картофеля: Любава (YВК), Тулеевский (YВК), Фиолетовый (XВК, SВК, MВК, YВК), Красавчик (XВК, SВК, MВК), Каменский (MВК) подвергались дополнительному оздоровлению.

    Растения, содержащие вирусы, высаживают в пробирки на питательную среду с добавлением ингибиторов вирусов виразола, хитозана, интерферона, в различных концентрациях (0,01-0,1 %) и сочетаниях. После каждого черенкования проводят диагностику методом иммуноферментного анализа (регистрируют результаты фотометром), для выявления скрытой вирусной инфекции. Оздоровленным от вирусной инфекции растениям in vitro присваивают номер линии и размножают методом микроклонального черенкования. 

    Применение ингибиторов вирусов в культуре in vitro позволило освободить от вирусов сорта картофеля: Каменский - МВК; Фиолетовый - SВК, MВК, YВК; Тулеевский - YВК; Красавчик - XВК, SВК, MВК; Любава - YВК.

     

    2 Ускоренное размножение картофеля в культуре in vitro

    Ускоренное размножение методом микроклонального черенкования в культуре in vitro на искусственной питательной среде – один из наиболее эффективных методов, позволяющий в короткие сроки получить необходимое количество растений свободных от инфекций [6].

    Главное требование к питательной среде – обеспечение высокого коэффициента размножения, то есть максимального выхода растений из микрочеренков в минимальные сроки. Для выращивания растений из черенков используют питательную среду с минеральной основой Мурасиге-Скуга.

    Микрорастения предназначенные для клонального микроразмножения должны быть зеленой окраски с хорошо развитой корневой системой и листовым аппаратом, с числом междоузлий не менее четырех. Не допускается использование растений нетипичных для сорта, слаборазвитых, ветвистых, пересохших.

    Размножение растений in vitro методом микроклонального черенкования проводится в стерильном боксе. После отрастания растений из верхушечных меристем до образования 5-6 листочков их пинцетом извлекают из пробирки и в простерилизованной чашке Петри разрезают на черенки, включающие часть стебля с одним листочком. Черенки сажают в пробирки с питательной средой на глубину междоузлия. Пробирки с посаженными растениями  помещают в специальное помещение с постоянным световым и влаготемпературным режимами (рисунок 2).

     

        

    Рисунок 2 – Растения картофеля в культуре in vitro

    Применение ингибиторов вирусов хитозана (0,05 %), интерферона (0,1 %, 0,05 %, 0,01 %), виразола 0,01 % + хитозан (0,01 %, 0,05 %), оказывает стимулирующее действие на морфогенез растений: увеличивается высота растений до 10,8 см, количество междоузлий с растения до 4,4 штук (таблица 1). Установлена тесная взаимосвязь между высотой растений и количеством междоузлий, r = 0,8751 (при R=0,6350).

    Таблица 1 – Характеристика растений in vitro, в зависимости от концентрации

    ингибиторов вирусов в питательной среде

    (лучшие варианты в среднем за 2011 - 2013 гг.)

    Сорт

     

    Вариант

     

    Высота

    растений, см

    Количество междоузлий, штук/ растение

    Выбраковано нестандартных растений, %

    Любава

    контроль

    5,4

    3,8

    33,3

    интерферон 0,1 %

    16,2

    7,7

    7,0

    хитозан 0,05 % + виразол 0,01 %

    8,8

    6,0

    0

    хитозан 0,1 % + виразол 0,01 %

    10,3

    6,5

    0

    Тулеевский

    контроль

    7,5

    5,0

    40,0

    интерферон 0,1 %

    15,9

    8,0

    0

    интерферон 0,05 %

    14,9

    7,2

    0

    хитозан 0,01 % + виразол 0,01 %

    8,4

    6,1

    6,8

     

    3 Приемы и методы ускоренного размножения картофеля

    Чтобы повысить коэффициент размножения сортов картофеля в ФГБНУ «Кемеровский НИИСХ» успешно применяют различные методы ускоренного размножения: стеблевое черенкование, получение отводков, ростковые черенки, клубневые единицы и другие.

     

    3.1 Выращивание рассады на торфяном субстрате в специально оборудованных помещениях (размножение методом  стеблевого черенкования)

    Растения in vitro размножают на торфяном субстрате до объемов, требуемых производством. В качестве субстрата для выращивания рассады используют верховой торф с низкой степенью разложения и зольностью 11-20 %, рН 5,3-5,5. Для выращивания рассады картофеля из пробирочных растений, миниклубней и индексов применяют полиэтиленовые контейнеры (размеры контейнера 47 см х 38 см х 20 см) или рассадные кассеты (рисунок 3).

     

        

    Рисунок 3 – Рассадные растения картофеля, выращенные в контейнерах и кассетах

    Пробирочные растения в возрасте 18-20 дней высаживают в контейнеры на торфяной субстрат по схеме 6 см х 6 см. Растения из пробирки извлекают с помощью пинцета непосредственно перед посадкой. Их осторожно вынимают, отрезают корневую систему, место среза обрабатывают ростовым веществом, состоящим из талька, гетероауксина, витамина В1.

    Контейнеры с посаженными растениями устанавливают на стеллажи, укрывая полиэтиленовой пленкой для лучшего укоренения. В первые дни растения необходимо проветривать встряхиванием пленки, через 5 дней после высадки пленку убирают.

    Оптимальный режим выращивания рассады в оборудованных помещениях: температура воздуха 18-240С, освещенность 6-10 тыс. люкс, светопериод 16 часов, влажность воздуха 85 %.

    Через 15-18 дней, в зависимости от сорта и условий выращивания, приступают к размножению меристемной рассады. Для этого острыми ножницами срезают верхушку стебля длиной не менее 2,5 см, оставляя на растении 2-3 листочка, и сажают на торфяной субстрат, предварительно обмакнув черенок в ростовую пудру. После срезки черенков маточные растения необходимо подкормить раствором Кнопа.

    Последнее черенкование проводят за месяц до высадки рассады. В условиях Кемеровской области срок высадки в теплицу вторая - третья декады мая, в открытый грунт после окончания угрозы возврата заморозков (вторая декада июня).

    Пробирочные растения можно выращивать и в кассетах. Подготовка торфяного субстрата, растений и уход такой же, что при выращивании растений в контейнерах. Только пробирочные растения высаживают по одному в стаканчик. Рассада, выращенная в кассетах, после высадки в грунт, приживается на 10,0-20,4 % лучше, чем из контейнеров.

    Для получения исходного материала при выращивании рассады берутся верхушки стебля от исходного растения при первом и втором черенковании (дочерняя культура) как наиболее продуктивное потомство. Самым продуктивным является внучатое потомство или отчеренкованные верхушки стебля от растений первого и последующих черенкований. На сортах Невский и Фреско достоверное увеличение продуктивности и количественного выхода клубней составило 28,9-63,6 %. Поэтому при последнем черенковании берутся верхушки стебля всех выращенных растений. Маточные (пробирочные) растения выбраковывают, так как полученное исходное клубневое поколение дает низкую продуктивность в следующих репродукциях [7].

    Рассада, выращенная в лабораторных условиях, имеет хрупкий, слабый стебель с удлиненными междоузлиями. Растения светло-зеленой окраски, иногда перерастают и переплетаются, что затрудняет их высадку в грунт.

    Поэтому после последнего черенкования на торфяном субстрате растения обрабатывают регулятором роста хлорхолинхлоридом (ЦЕ-ЦЕ-ЦЕ) в фазе 3-4 листочков дозой 0,1 %. После обработки препаратом рассадные растения картофеля к моменту высадки в грунт формируют хорошо развитую корневую систему, низкорослый стебель с укороченными междоузлиями и мощный листовой аппарат.

    По результатам исследований от применения препарата ЦЕ-ЦЕ-ЦЕ рассада, высаженная в открытый грунт более устойчива к неблагоприятным  погодным условиям. В среднем за 2 года по сорту Невский на необработанных делянках приживаемость составила 17,5 %, а на обработанных ЦЕ-ЦЕ-ЦЕ в дозе 0,1 % д.в. – 79 %. Повышается устойчивость к вирусным инфекциям, бактериозам и грибным болезням. Увеличиваются коэффициент размножения и выход количества исходных клубней картофеля с единицы площади [8].

    При многократном черенковании в культуре in vivo на торфяном субстрате в течение 60-70 дней в 2014 году получено 14 тыс. рассадных растений картофеля, в том числе по сортам: Тулеевский – 4 тыс., Любава – 2,5  тыс., Кузнечанка – 2,0 тыс., Невский – 2 тыс., Танай – 1,0 тыс., Кемеровчанин – 1,0 тыс., коллекционные сорта – 1,5 тыс.

     

    3.2 Выращивание рассады на смешенном субстрате

    При переходе от культивирования растений в пробирочной культуре к получению исходных клубней важным является выбор метода ускоренного размножения исходных растений  в рассадной культуре.  Одним из эффективных методов является состав применяемого субстрата.

    Использование вермикулита мелких фракций (от 2 до 10 мм)  в чистом виде либо в качестве компонента торфяного субстрата (до 40 %) для укоренения черенков позволяет значительно улучшить характеристики посадочной смеси. Повышается пористость и рыхлость, а значит, воздухопроницаемость. Корни равномерно развиваются по всему земляному кому. Вермикулит имеет высокую ионообменную способность и удерживает положительно заряженные ионы калия, магния и других элементов питания, постепенно отдавая их растению.

    Исследования по выбору состава субстрата для выращивания растений картофеля in vitro в рассадной культуре проведены  на основе торфа марки «Агробалт – С» и вермикулита.

    Всю последовательность операций по посадке пробирочных растений и уходу за рассадой проводят аналогично пункту 3.1.

    В результате исследований выявлен сбалансированный состав субстрата для выращивания рассады (торф марки «Агробалт – С» 75 % + вермикулит 25 %), обеспечивающий приживаемость пробирочных растений картофеля в рассадной культуре от 88 % до 98 %, увеличивающий выход микрочеренков до 77 % (таблица 2).

    Таблица 2 – Оценка растений in vitro в рассадной культуре

    Вариант

    Приживаемость, %

    Выход черенков, шт. с варианта опыта

    Коэффициент размножения

    Выход клубней,

    шт./м2

    Кемеровчанин

    Торф 100 % (контроль)

    56

    190

    3,4

    11,9

    Торф 75% + вермикулит 25%

    88

    264

    3,0

    19,1

    Вермикулит 100 %

    100

    110

    1,1

    6,5

    Тулеевский

    Торф 100 % (контроль)

    83

    182

    2,2

    18,2

    Торф 75% + вермикулит 25%

    95

    323

    3,4

    23,0

    Вермикулит 100 %

    100

    30

    0,3

    14,7

     

    При дальнейшем выращивании рассадных растений картофеля, полученных на данном субстрате, в грунте повышается количество исходных клубней с единицы площади на 26-60 % [5].

           

            3.3 Выращивание пробирочных растений в закрытом грунте

    Для выращивания исходных клубней оздоровленного картофеля из пробирочных растений используют теплицы. Теплицы позволяют сохранить исходные клубни от вторичного заражения и повысить приживаемость, что увеличивает выход оздоровленных клубней. Могут использоваться теплицы любой конструкции. По всему периметру на высоте 1,0-1,5 м должны быть марлевые стенки (или любой другой материал, пропускающий воздух и задерживающий лет тлей). Верх теплицы из полиэтиленовой пленки или поликарбоната со встроенными фрамугами.

    Лучшим грунтом для пробирочных растений является смесь перепревшего навоза и дерновой земли в соотношении 1:1 или торф с дерновой землей и перегноем в соотношении 0,5:1:0,5. Для посадки необходима рыхлая почва, что достигается перепашкой с последующим фрезерованием. Схема посадки в теплице в гряды двухстрочная 75 см + (40 см х 20 см). Для крупноклубневых сортов картофеля (Тулеевский, Удалец, Кемеровчанин, Любава) целесообразно уменьшить шаг посадки до 15 см, а для менее крупных (Невский, Накра, Кузнечанка, Танай)  увеличить до 20-25 см.

    Высадку пробирочных растений в теплицу следует проводить в третьей декаде мая. При снижении температуры воздуха ниже 150С опускают на марлю полиэтиленовую пленку и закрывают фрамуги.

    Пробирочные растения в возрасте 18-20 дней с развитым листовым аппаратом и корневой системой лучше высаживать в пасмурный день или вечером в обильно увлажненный грунт. За 4-6 дней до высадки растений в грунт с пробирок  снимают пробки. Это необходимо для улучшения приживаемости, адаптации листового аппарата к внешней среде. Растения достают из пробирок с помощью пинцета, отмывают корневую систему от питательной среды и высаживают в грунт, после чего почву и растения аккуратно проливают. При этом способе посадки приживаемость растений составляет от 60 до 90 %.

    В исследованиях (2006-2007 гг.) по выращиванию исходных оздоровленных клубней в тепличных условиях, максимальное количество клубней получено при данном способе размножения растений, в том числе на сорте Тулеевский 4,8-6,1, Кузнечанка 7,6-8,7, Удалец 6,4-7,4 штуки на куст. В процессе репродуцирования в питомнике первого полевого поколения, из миниклубней полученных от пробирочных растений в закрытом грунте, урожайность составила у сортов картофеля Тулеевский 23,0-26,5 т/га, Кузнечанка 40,8-43,3 т/га и Удалец 32,6-37,1 т/га [9,10].

     

    3.4 Укоренение верхушек и пазушных побегов

    У высаженных в теплицы пробирочных растений, при достижении высоты 20-25 см, срезают верхушки, что стимулирует рост пазушных побегов. Срезанные вершинки стебля размером 5-6 см с наличием 2-3 листьев в течение 6 часов выдерживают в водном растворе гетероауксина (50 мг/л), предварительно растворённого в 2 мл этилового спирта, затем высаживают в торфяной  субстрат, размещённый в контейнерах размером 47 см х 38 см х 20 см, на глубину междоузлия. Схема посадки растений 6 см х 6 см. Контейнеры с высаженными растениями укрывают полиэтиленовой пленкой для создания парникового эффекта на 4-5 дней, ежедневно проветривая встряхиванием пленки.

    Через 10 дней верхушки высаживают в теплицу. За это время они хорошо укореняются и трогаются в рост. Спустя 7-10 дней после срезания вершинок стебля маточного растения, срезают пазушные побеги для посадки их в торфяной  субстрат. Приживаемость пазушных побегов выше на 10-20 %, чем верхушек, так как молодое растение более жизнеспособно. Высаживают их в теплицы по схеме посадки, как и пробирочные растения в гряды в две строчки 75 см + (40 см х 20 см). Наибольшая продуктивность получена у вершинных и пазушных побегов срезанных с растений до фазы бутонизации у сортов Невский 9,0-9,4 шт./куст, Фреско 7,7-8,1 шт./куст соответственно.

     

    3.5 Размножение ростковыми черенками

    Для быстрого введения в схему семеноводства вновь созданных сортов картофеля применяют способ ускоренного размножения ростковыми черенками, используя клубни по морфологическим признакам соответствующие оригинальному сорту, свободные от патогенов (вирусные, бактериальные, грибные инфекции). Такие клубни картофеля массой 150-200 г закладывают на длительное проращивание при комнатной температуре. Проращивание ростков проводится на фильтровальной бумаге в течение 60 дней с чередованием света и темноты. Клубни выдерживают в темноте в течение 14 дней, темнота создается накрытием клубней черной светонепроницаемой пленкой, затем в течение 7 дней клубни выдерживают при естественном освещении. Это способствует образованию продуктивных ростков на клубнях.

    Выращенные таким способом ростки отделяют от клубня и разрезают на сегменты с одной - двумя зачаточными почками, которые укладывают на влажную фильтровальную бумагу в кюветы и накрывают стеклом до образования корешков, обычно на 4-5 дней (рисунок 4).

     

     

    Рисунок 4 – Ростковые черенки сорта Кемеровский

    После этого сегменты высаживают в контейнеры с увлажненным торфом. Через  10-14 дней из каждого сегмента вырастает нормально укоренившееся растение высотой 8-10 см, которое готово для посадки в открытый грунт или в теплицу. При таком способе ускоренного размножения можно получить от одного клубня по сортам Невский 208-257 и Кемеровский 246-262 исходных клубней.

     

    3.6 Размножение рассадой из глазков клубня

     Свободные от патогенов клубни, прошедшие диагностику ИФА, проращивают. Ножом или ложечкой для взятия индексов вырезают глазки диаметром 2,5 см с мякотью и высаживают в торфяной субстрат, помещённый в контейнеры. Срок высадки глазков в торфяной субстрат зависит от условий дальнейшего выращивания рассады: для теплицы 25-30 апреля, а  для открытого грунта 25-30 мая. Высаженные в торфяной субстрат глазки подкармливают раствором Кнопа каждые 10 дней.

    При отрастании растений до 3-4 настоящих листочков рассаду обрабатывают 0,1 %-ным раствором ЦЕ-ЦЕ-ЦЕ, что предотвращает не желательное «вытягивание» растений и  улучшает процесс корне- и клубнеобразования.

    По достижении высоты рассады 10-12 см её высаживают в теплицу (третья декада мая) в гряды в две строчки по схеме 75 см + (40 см х 20 см). Высадку рассады в открытый грунт нужно проводить  после прохождения периода  угрозы возврата заморозков (вторая декада июня), в гребни по схеме 75 см х 30 см.

    При этом способе размножения количество клубней на куст невысокое – 3,2-5,7 шт., но увеличивается средняя масса клубня у сорта Тулеевский от 96,7 г до 104,9 г, Кузнечанка 77,7-98,6 г и Удалец 134,5-152,2 г. [10].

    В процессе дальнейшего репродуцирования в питомнике первого полевого поколения, из миниклубней выращенных этом способом, урожайность составила у сортов Тулеевский – 23,0 т/га, Кузнечанка – 38,4 т/га, Удалец – 35,7 т/га.

     

    3.7 Получение миниклубней из индексов

    После уборки урожая (конец октября начало ноября) клубни картофеля свободные от вирусной и бактериальной инфекции (по результатам ИФА) закладывают на проращивание. Для увеличения проснувшихся почек, состояние покоя прерывают обработкой клубней раствором гиббереллина (состав маточного раствора: 1 г д. в. гиббереллина на 1 литр воды; приготовление рабочего раствора: 10 мл маточного раствора на 10 л воды). Проснувшиеся  почки с кусочком мякоти 15-20 г (индекс) вырезают специальной ложечкой диаметром 2,5 см.

    Индексы высаживают на торфяной субстрат в контейнеры, после чего последние устанавливают на стеллажи и укрывают пленкой для поддержания высокой влажности воздуха в течение 4-5 дней. Оптимальный режим для выращивания рассады в оборудованных помещениях: температура воздуха 18-240С, освещенность 6-10 тыс. люкс, светопериод 16 часов, влажность воздуха 85 %.

    При отрастании растений 5-8 см их подсыпают торфяным субстратом, подкармливают раствором Кнопа и опрыскивают 0,1 % д. в. раствором ЦЕ-ЦЕ-ЦЕ, чтобы исключить «вытягивание» стебля. Растения выращивают в течение  60-65 дней. В таких условиях каждое растение в среднем образует 2-4 клубня, с массой от 2 г до 15 г. Выкапывают клубни в I – II декадах февраля. Полученные миниклубни успевают пройти период покоя и в мае-июне имеют наклюнувшиеся глазки (тронувшиеся в рост почки), готовые к высадке в поле.

     

    3.8 Размножение миниклубнями 

    Миниклубни картофеля размером от 2 г до 15 г не технологичны при механизированной посадке в полевых условиях, но являются ценным посадочным материалом, поэтому их целесообразно выращивать в закрытом грунте или специализированных площадках открытого грунта, где можно в полной мере использовать эффективные способы получения исходных клубней.

    Первый способ. Мелкие клубни 2-4 г закладывают на проращивание при комнатной температуре 18-200С в неосвещенное помещение на 7-10 дней. Проклюнувшиеся клубни высаживают в рассадные кассеты, заполненные торфяным субстратом за месяц до высадки рассады в открытый грунт. Кассеты устанавливают на стеллажи. Оптимальный режим выращивания рассады в оборудованных помещениях: температура воздуха 18-240С, освещенность 6-10 тыс. люкс, светопериод 16 часов, влажность воздуха 85 %. Рассадные растения высотой 5-8 см подсыпают торфяным субстратом, опрыскивают 0,1 % д. в. раствором ЦЕ-ЦЕ-ЦЕ, чтобы исключить «вытягивание» стебля.

    В течение 30 дней из миниклубней вырастают рассадные растения, имеющие 1-3 коротких крепких стеблей, хорошую корневую систему. В третьей декаде мая полученную таким способом рассаду высаживают в теплицу в гряды в две строчки 75 см + (40 см х 20 см). Высадку рассады в открытый грунт можно проводить при отсутствии угрозы возврата заморозков, в гребни по схеме 75 см х 30 см.

    В наших исследованиях (2006-2007 гг.) на сортах Тулеевский, Кузнечанка, Удалец при этом способе размножения получено 3,9-5,1 клубней на куст.

    Масса одного клубня, в зависимости от сорта, составила 72,2-130,0 г. В последействии, в питомнике первого полевого поколения из миниклубней, получена урожайность на сорте Тулеевский – 29,4 т/га, Удалец – 36,1 т/га.

    Второй способ. Пророщенные миниклубни массой от 5 г до 15 г, высаживают в открытый грунт вручную в третьей декаде мая в заранее нарезанные гребни. Схема посадки 75 см х 20 см. Глубина заделки миниклубня 4-5 см. от поверхности гребня. Уход за посадками включает: прополку, обработку инсектицидами и фунгицидами, наращивание гребней при отрастании растений на 10 см.  За 5-7 дней до уборки необходимо удалить ботву. При данном способе выращивания продуктивность куста по количеству клубней составила у сортов: Любава 12-20 шт., Тулеевский 12-15 шт., Кузнечанка 18-20 шт., Танай 8-14 шт., Кемеровчанин 8-10 шт. (рисунок 5).

     

        

    Рисунок 5 – Исходные клубни картофеля сорта Любава, полученные из миниклубней

     

    3.9 Получение миниклубней в грунте методом уплотненной посадки

    Данный метод применяют с целью получения максимального количества оздоровленных клубней с единицы площади закрытого грунта.

    Первый способ. Рассадные растения полученные любым из выше приведённых способов высаживают в теплицу в гряды с густотой посадки 7, 10 и 15 шт./м2. Наибольшее количество клубней с одного растения получено при густоте посадки  7 шт./м2,но выход клубней различался по сортам Невский – 9,2 шт./куст, Любава – 10,4 шт./куст и Накра – 5,8 шт./куст. Чем выше густота посадки, тем меньше количество и масса клубней, но выше выход клубней с единицы площади закрытого грунта. В зависимости от сорта выход клубней с 1 м2 составил 100-130 исходных клубней.

    Второй способ. Рассадные растения высаживают в контейнеры размером 47 см  х 38 см и высотой 20 см, заполненные торфяным субстратом, схема посадки 7 см х 8 см. В возрасте 28-30 дней контейнеры с рассадой переносят в теплицу, но растения не высаживают, а устанавливают на землю, растения дополнительно подсыпают торфяным субстратом. Между контейнерами обильно пересыпают торфяным субстратом, с боков почву хорошо уплотняют (рисунок 6).

    По мере отрастания растений в контейнеры дополнительно подсыпают торфяной субстрат. При этом можно получить до 167-250 шт. миниклубней с одного метра квадратного.

     

     

    Рисунок 6 - Метод уплотненной посадки

     

    3.10 Уход за растениями в закрытом и открытом грунте

    При выращивании растений картофеля необходимы следующие агротехнические мероприятия.

    Сразу после высадки растений из пробирок необходимо создать микроклимат на 3-4 дня прикрыв их пленкой на высоте 25-30 см, и проветривать дважды в день встряхиванием пленки. Растениям картофеля, полученным рассадным способом, после высадки в грунт не требуется создание микроклимата. Обильный ежедневный полив производят теплой водой под корень. На следующий день после полива – обязательное рыхление. По мере необходимости проводят прополку сорняков с одновременным подокучиванием растений. В фазу бутонизации растения окучивают как можно выше и поливают в борозды по мере подсыхания.

    Получение исходных клубней предусматривает проведение фитосортовых прочисток в фазу цветения и перед уборкой. Защитные мероприятия против болезней проводят по мере необходимости любым имеющимся в распоряжении фунгицидом. В течение вегетации осуществляют тщательный многократный визуальный контроль рассадных растений с дополнительной проверкой каждого растения методом ИФА перед уборкой. Здоровые растения, предназначенные для отбора, должны отвечать морфологическим признакам конкретного сорта.

    К клубням отобранных растений предъявляются следующие требования: все клубни куста должны быть типичны для данного сорта, без признаков веретеновидности, здоровые, количество товарных клубней — характерное для сорта. Урожай каждого куста убирают в отдельный пакет с отверстиями для дыхания клубней, и закладывают на хранение.

     

    4 Техника проведения иммуноферментного анализа

    Главной задачей при получении оздоровленного материала является проведение исследований на зараженность вирусными и бактериальными болезнями.

    При помощи визуального метода невозможно выявить и оценить уровень зараженности картофеля патогенами, когда присутствие в семенном материале вирусной и бактериальной инфекции еще не проявилось по внешним признакам [11].

    В связи с этим на всех этапах производства оздоровленного исходного материала проводят неоднократную диагностику с использованием метода иммуноферментного анализа на наличие скрытой вирусной и бактериальной инфекции.

    Первый этап – выращивание меристем.

    Второй этап – микроклональное черенкование в культуре in vitro.

    Третий этап – выращивание рассады на торфяном субстрате.

    Четвертый этап – получение исходных клубней из рассады. Перед уборкой тестируется каждое растение картофеля.

    Определяют вирусы SBK, XBK, MBK, YBK, ABK, PLRV, а также бактериозы черная ножка и кольцевая гниль.

    Техника проведения анализа отработана в лаборатории биотехнологии картофеля Кемеровского научно-исследовательского института сельского хозяйства на основе «Инструкции по использованию иммуноферментного диагностического набора для определения вирусов и бактериозов картофеля» [12]; Методических рекомендаций Elisa - тест virus А, П, Y, L Bestell-Numiner 07032 [13].

    Анализ проводится поэтапно (рисунок 7).

     

     

    Рисунок 7 – Схема лабораторного тестирования листовых и клубневых проб  методом иммуноферментного анализа

    Первый шаг. В лунки плашки вносят раствор со специфическим антителом Х, S, M, Y, A, L вирусов и бактериозов ЧН и КГ (черной ножки и кольцевой гнили).

    Второй шаг. В лунки  плашки вносят сок растений, антиген Х, S, M, Y, A, L вирусов и бактериозов ЧН и КГ соединяется с ранее закрепившимися антителами, образуется соединение «антитело-антиген».

    Третий шаг. В лунки плашки вносят раствор коньюгата. Соединение реагирует с антителом АР-конъюгат, при этом образуется так называемый «сэндвич» - двойное тело.

    Четвертый шаг. Внесение субстрата в лунки плашки.  Происходит ферментативная реакция окисления ортофенилендиамина с помощью кислорода, отщепленного от перекиси водорода. Если в тестируемом материале есть вирус, то получается комплекс «антитела-вирус-антитела-фермент». В результате ферментативной реакции с субстратом развивается ярко-оранжевая окраска, определяющаяся как инструментально, так и визуально.

    В качестве образцов для анализа используют листья, клубни, свежесрезанные стебли, стебли, хранившиеся в сухом месте не более 3 месяцев, отрезки стеблей длиной 5-10 см, которые отбирают во время уборки картофеля (рисунок 8).

     

        

    Рисунок 8 – Получение сока из микрорастений и его нанесение в лунки полистероловых плат

    Оценка результатов  

    Оценку результатов ИФА проводят с помощью фотометра при длине волны 490 нм с остановкой реакции серной кислотой или без остановки реакции при длине волны 450 нм. В качестве «blank» (отрицательный контроль) используют лунку, в которой в качестве образца внесен пробно-коньюгатный буфер. Устанавливают считывающее устройство на эту лунку и нажимают клавишу blank. Теперь оптическое поглощение в этой лунке прибор автоматически обнуляет и соотносит с ним оптическое поглощение других лунок. Далее считывают оптическую плотность в оставшихся лунках. Оптическое поглощение для положительных проб должно превышать поглощение отрицательных проб минимум в три раза: Р = 3Х, где Р – порог достоверности положительных результатов, Х –значение А490(450) для отрицательных контролей (на всех платах набора) [14].

    - образцы, имеющие А490 или А450 в интервале А490(450) = ≤ 2Х считаются отрицательными,

    - образцы, имеющие А490 или А450 в интервале А490(450) = 2Х – 3Х относят ни к зараженным,  ни к здоровым, их необходимо проанализировать повторно (рисунок 9).

               

    Рисунок 9 – Оценка результатов анализа с помощью фотометра и визуально

    При отсутствии фотометра оценку результатов ИФА проводят визуально. При визуальной оценке результатов анализа, дающей информацию «да» или «нет», можно применять следующую шкалу:

    - растение здоровое – едва заметное окрашивание, как в отрицатель­ном контроле;

    - растение зараженное – хорошо заметное окрашивание, отличное от отрицательного контроля.

    Информацию фиксируют в ведомости [15].

     

     

    Сорта картофеля созданные Кемеровским НИИСХ и внесенные в

    Госреестр селекционных достижений и допущенных к использованию,

    оздоровленные и предложенные товаропроизводителям

     

    ЛЮБАВА

     

      

     Происхождение. Удача х 733-65

    Назначение. Столовый.

    Срок созревания. Ранний.

    Морфологические признаки. Куст раскидистый, средней высоты. Цветки красно-фиолетовые с белыми кончиками. Клубни овальной формы с оттянутым столонным следом. Окраска кожуры красная, шелушащаяся. Глазки малочисленные, среднеглубокие, красные. Окраска мякоти белая.

    Хозяйственные признаки. Урожайность в первой копке на 60 день после посадки 15-20 т/га. Потенциальная урожайность 50-56 т/га. Товарность 90-96 %. Масса товарного клубня 120-220 г. Крахмалистость 13-16 %. Вкусовые качества и сохранность хорошие.

    Устойчивость к болезням.  Устойчив к вирусным болезням. Относительно устойчив к фитофторозу, парше обыкновенной, кольцевой гнили, ризоктониозу. Слабо восприимчив к альтернариозу.

    Дополнительная информация. Включён в Государственный реестр селекционных достижений с 2003 года по 9-12 регионам [16].

     
    ТУЛЕЕВСКИЙ
     
      

    Происхождение. Чернский х Толлокан

    Назначение. Столовый.

    Срок созревания. Среднеранний

    Морфологические признаки. Растение средней высоты, полупрямостоячее. Венчик очень крупный, белый. Клубень овальный с очень мелкими глазками. Кожура слегка шероховатая. Окраска клубней желтая, мякоть клубня желтая.

    Хозяйственные признаки. Товарная урожайность 18,0-42,4 т/га. Потенциальная урожайность 50-55 т/га.  Масса товарного клубня 122-270 г. Товарность 88-99 %. Содержание крахмала 13-16 %. Вкусовые качества хорошие и отличные сохранность хорошая.

    Устойчивость к болезням. Устойчив к возбудителю рака картофеля, восприимчив к золотистой картофельной цистообразующей нематоде. Умеренно устойчив по ботве и умеренно восприимчив по клубням к возбудителю фитофтороза. Относительно устойчив к парше обыкновенной, альтернариозу.

    Дополнительная информация. Включен в Государственный реестр селекционных достижений с 2006 г. по 4, 10-12 регионам.

     
    КУЗНЕЧАНКА
     
      

    Происхождение. Невский х Зарево

    Назначение. Столовый.

    Срок созревания. Среднеранний

    Морфологические признаки. Куст средней высоты, лист средний, интенсивность цветения средняя, окраска цветков красно-фиолетовая. Окраска клубня красная, мякоти белая; форма клубня округло-овальная, глазки поверхностные, кожура гладкая.

    Хозяйственные признаки. Потенциальная урожайность 45,0-50,0 т/га. Масса товарного клубня 140-180 г. Товарность 93-97 %. Содержание крахмала 12,5-16,3 %. Вкусовые качества хорошие.

    Устойчивость к болезням. Устойчив к раку картофеля. Относительно устойчив к вирусам, фитофторозу, парше обыкновенной.

    Дополнительная информация.  Пригоден для переработки на хрустящий картофель. Включен в Государственный реестр селекционных достижений с 2009 г. по 4, 10, 11 регионам.

                                
    ТАНАЙ
     
      

    Происхождение. Удача х Пролисок

    Назначение. Столовый.

    Срок созревания. Среднеранний

    Морфологические признаки. Растение средней высоты. Окраска цветков белая. Окраска клубней и мякоти желтая, форма клубней округло-овальная, глазки средней величины.

    Хозяйственные признаки. Потенциальная урожайность до 50 т/га.     Масса товарного клубня 100-180 г. Содержание крахмала 13-16%. Вкусовые качества и сохранность хорошие.

    Устойчивость к болезням. Средневосприимчив к фитофторозу и вирусам. Устойчив к раку и картофельной нематоде.

    Дополнительная информация. Положительно отзывается на орошение. Включен в Государственный реестр селекционных достижений с 2011 г. по 10 региону.

     
    КЕМЕРОВЧАНИН
     
      

    Происхождение. Удача х Пролисок

    Назначение. Столовый.

    Срок созревания. Среднеранний

    Морфологические признаки. Растение средней высоты. Окраска цветков белая. Клубни – жёлтые, округлые, глазки средней глубины, малочисленные. Мякоть жёлтая.

    Хозяйственные признаки. Потенциальная урожайность до 55 т/га.     Масса товарного клубня 120-200 г. Содержание крахмала 13-17,5 %. Вкусовые качества и сохранность хорошие.

    Устойчивость к болезням. Обладает высокой устойчивостью к фузариозному увяданию и вирусам, средне устойчив к фитофторозу, относительно устойчив к альтернариозу. Устойчив к раку и картофельной нематоде.

    Дополнительная информация. Включен в Государственный реестр селекционных достижений с 2013 г. по 10 региону.


    НАКРА
     
      

    Происхождение. 596-79 х Зарево

    Назначение. Универсальный.

    Срок созревания. Среднеспелый

    Морфологические признаки. Куст прямостоячий, высокий Цветки красно-фиолетовые, венчик большой, цветение среднее, кратковременное. Клубень овально-округлый, окраска кожуры красная, поверхность кожуры гладкая. Окраска мякоти светло-желтая. Глазки средней глубины. Световой росток красно-фиолетовый, опушенный.

    Хозяйственные признаки. Потенциальная урожайность до 45 т/га. Масса товарного клубня 80-120 г. Товарность 85-96 %. Содержание крахмала 17-24 %. Вкусовые качества и сохранность хорошие.

    Устойчивость к болезням. Устойчив к раку, парше обыкновенной. Относительно устойчив к фитофторозу и вирусам. Слабо поражается колорадским жуком.

    Дополнительная информация. Пригоден для приготовления хрустящего картофеля. Включен в Государственный реестр селекционных достижений с 2000 г. по 4, 10, 11 регионам.

     
    УДАЛЕЦ
     
      

    Происхождение. Чернский х Толлокан

    Назначение. Столовый.

    Срок созревания. Среднеранний.

    Морфологические признаки. Растение низкое, промежуточного типа, полупрямостоячее. Венчик очень крупный, красно-фиолетовый. Клубень овальный с очень мелкими глазками. Кожура гладкая, желтая. Мякоть белая.

    Хозяйственные признаки. Товарная урожайность 21,3-49,6 т/га, потенциальная урожайность 55-60 т/га.  Масса товарного клубня 177-392 г.  Товарность 86-91 %. Содержание крахмала 12-16 %. Вкусовые качества и сохранность хорошие.

    Устойчивость к болезням. Устойчив к раку. Слабо поражается золотистой картофельной цистообразующей  нематодой. Относительно устойчив к фитофторозу, парше обыкновенной, альтернариозу.

    Дополнительная информация. Включен в Государственный реестр селекционных достижений с 2006 г. по 10 региону.

     

     

    Сорта картофеля использованные в исследованиях

    Кемеровский (Кемеровская ГСХОС).  Среднепоздний, с ранним клубнеобразованием, столового назначения. Цветки белые. Клубни и мякоть белые, округло-овальные, глазки глубокие. Потенциальная урожайность до 50 т/га. Содержание крахмала 13-16 %. Средневосприимчив к фитофторозу и вирусам. Жаровынослив и засухоустойчив.

    Невский (Всеволожская селекционная станция). Среднеранний, столового назначения. Цветки белые. Клубни белые, округло-овальные, мякоть белая. Глазки поверхностные, окрашены. Потенциальная урожайность до 55 т/га. Содержание крахмала 12-17 %. Устойчив к раку. Относительно устойчив к фитофторозу. Вирусными болезнями поражается умеренно [17].

    Каменский (ГНУ Уральский НИИСХ). Раннеспелый, столового назначения. Растение промежуточного типа, полупрямостоячее. Клубень удлененно-овальный с мелкими глазками, кожура красная, мякоть светло-желтая. Максимальная урожайность 25,2 т/га, масса товарного клубня 96-108 г. Содержание крахмала 12,2-16,8 %. Устойчив к возбудителю рака картофеля, восприимчив к золотистой картофельной цистообразующей нематоде. Устойчив к морщинистой и полосчатой мозаике, скручиванию листьев.

    Красавчик (ВНИИКХ). Среднеранний, универсального назначения. Растение средней высоты, промежуточного типа, полупрямостоячее. Клубень овальный с мелкими глазками. Кожура гладкая, красная, мякоть кремовая. Максимальная урожайность 28,4 т/га, масса товарного клубня 91-166 г. Содержание крахмала 12,4-17,8 %. Устойчив к возбудителю рака картофеля, восприимчив к золотистой картофельной цистообразующей нематоде. Устойчив к морщинистой и полосчатой мозаике.

    Фиолетовый (ВНИИКХ). Среднеспелый, столового использования. Растение компактное, низкорослое, окраска цветков слабо-красно-фиолетовая. Клубни округло-овальной формы, кожура фиолетовая, мякоть фиолетовая, глазки мелкие, масса товарного клубня 70-80 г. Урожайность 10,0-15,0 т/га, товарность средняя, лёжкость хорошая, содержание крахмала 10-12 %. Устойчив к раку, относительно устойчив к ризоктониозу, парше. Слабоустойчив к вирусным болезням. Ценность сорта: высокое содержание антиоксидантов, сорт диетического питания.

    Фреско (Нидерланды). Раннеспелый, универсального использования. Растение средней высоты, окраска цветков белая. Клубни округлоовальной формы, кожура желтая, мякоть светложелтая, глазки мелкие, масса товарного клубня 100-130 г. Урожайность в государственном сортоиспытании  20-39 т/га (максимальная 45 т/га), товарность 88-99 %, лежкость 78-93 %, содержание крахмала 12-17 %, вкусовые качества хорошие. Устойчив к раку, картофельной нематоде, среднеустойчив к вирусам, ризоктониозу, парше обыкновенной, восприимчив к фитофторозу по листьям, относительно устойчив по клубням.

     

     

    Библиографический список  

    1 Трофимец Л.Н. Безвирусное семеноводство картофеля: Рекомендации / Л.Н. Трофимец, В.В. Бойко, Б.В. Анисимов и др. М.: Агропромиздат, 1991. – 31 с.

    2. Блоцкая Ж.В. Вирусные, вироидные и фитоплазменные болезни картофеля / Ж.В. Блоцкая - Минск: Тэхналогiя, 2000. – 119 с.

    3. Симаков Е.А. Новые технологии производства оздоровленного исходного материала в элитном семеноводстве картофеля / Е.А. Симаков. – М.: 2000. – 80 с.

    4. Блоцкая Ж.В. Вирусные болезни картофеля / Ж.В. Блоцкая  – Минск: Наука и техника, 1993. – 222 с.

    5. Отчет о научно-исследовательской работе за 2011 – 2014 г.г. Усовершенствовать технологическую схему оздоровления и ускоренного размножения картофеля / Руководители: Н. А. Лапшинов, В. И. Куликова. Исполнители: В. И. Куликова, Т.В. Рябцева – Кемерово, 2014. - 38 с.

    6. Новые технологии производства оздоровленного исходного материала в элитном семеноводстве картофеля: Рекомендации. - М: ГУП «Агропрогресс», 2000. - 80 с.

    7. Игнатьева В.И. Методы ускоренного размножения картофеля, используемые в первичном семеноводстве: Информлисток / В.И. Игнатьева, В.Ф. Полеваева - Кемерово, 1998. - 4 c/

    8. Игнатьева В.И. Использование регулятора роста при выращивании рассады картофеля / В.И. Игнатьева, В.Ф. Полеваева, С.В. Белова - Кемерово: ЦНТИ, 1998. - 4 c.

    9. Отчет о научно-исследовательской работе за 2006 г. Усовершенствовать технологию оздоровления и размножения исходного материала для оригинального и элитного семенного картофеля в соответствии с современной моделью ведения оригинального семеноводства / Руководители: Н.А. Лапшинов, В.И. Куликова. Исполнители: В.И. Куликова, В.П. Ходаева – Кемерово, 2006. - 25 c.

    10. Отчет о научно-исследовательской работе за 2007 г. Усовершенствовать технологию оздоровления методом апикальной меристемы и размножения исходного материала в культуре in vitro и in vivo для оригинального и элитного семенного картофеля в соответствии с современной моделью ведения оригинального семеноводства / Руководители: Н.А. Лапшинов, В.И. Куликова. Исполнители: В.И. Куликова, В.П. Ходаева – Кемерово, 2007. -  25 с.

    11. Контроль качества и сертификация семенного картофеля: Практическое руководство. - М.: ФГНУ «Росинформ-агротех», 2003. - 316 с.

    12. Инструкции по использованию иммуноферментного диагностического набора для определения вирусов картофеля – Коренево: 2003. – 10 с.

    13. Методика анализа Elisa - тест virus А, П, Y, L Bestell-Numiner 07032 . - Голландия, 1991. - 18 с.

    14 Инструкция по применению иммуноферментного диагностического набора для определения возбудителей вирусов и бактериозов картофеля ВНИИКХ. – Коренево, 2011. – 9 с.

    15. Куликова В.И. Диагностика вирусов и бактериозов в процессе оздоровления и размножения семенного картофеля оригинальном семеноводстве: Методические рекомендации / В.И. Куликова, Н.А. Лапшинов, Т.В. Рябцева. Сиб. отд-ние РАСХН, ГНУ «Кемеровский НИИСХ». - Кемерово:  2008. – 36 с.

    16. Аношкина Л.С. Сорта картофеля возделываемые в Кузбассе: каталог / Л.С. Аношкина, Н.А. Лапшинов, В.И. Куликова. Россельхозакадемия. Сиб. отд-ние. ГНУ Кемеровский НИИСХ. – Кемерово, 2009. - 16 с.

    17. Сорта картофеля, возделываемые в России: 2009. Ежегодное справочное издание. – М., Агроспас, 2009 – 92 с.

     

     

     

    СОДЕРЖАНИЕ

    Введение ………………………………………………………………………...

    3

    1 Оздоровление картофеля методом апикальной меристемы …………………

    5

    1.1 Отбор базовых клонов ……………………………………………………….

    5

    1.2 Термотерапия …………………………………………………………………

    5

    1.3 Проращивание ………………………………………………………………..

    6

    1.4 Вычленение верхушечных меристем ……………………………………….

    6

    1.5 Метод апикальных меристем в сочетании с химиотерапией …………….

    8

    2 Ускоренное размножение картофеля в культуре in vitro …………………...

    10

    3 Приемы и методы ускоренного размножения ………………………………...

    12

    3.1 Выращивание рассады в специально оборудованных помещениях …..

    12

    3.2 Выращивание рассады на смешенном субстрате …………………………

    14

    3.3 Выращивание пробирочных растений в закрытом грунте …………….

    15

    3.4 Укоренение верхушек и пазушных побегов ……………………………

    16

    3.5 Размножение ростковыми черенками …………………………………..

    17

    3.6 Размножение рассадой из глазков клубня ……………………………..

    18

    3.7 Получение миниклубней из индексов ………………………………….

    19

    3.8 Размножение миниклубнями ………………………………………………

    19

    3.9 Получение миниклубней в грунте методом уплотненной посадки ……..

    20

    3.10 Уход за растениями в закрытом и открытом грунте ………………….

    21

    4. Техника проведения иммуноферментного анализа ………………………

    22

    Сорта картофеля созданные в Кемеровском НИИСХ и внесенные в

    Госреестр селекционных достижений допущенных к использованию …...

     

    26

    Список использованной литературы …………………………………………...

    30

     

    Лапшинов Н.А.

    Куликова В.И.

    Рябцева Т.В.

    Ходаева В.П.

    Аношкина Л.С.

     

    Технология оздоровления и ускоренного размножения картофеля

    (Методическое пособие)

     

    Подписано в печать ____ .11. 2014. Формат 60х84 1/16

    Усл. печ. л. ____. Тираж ____. Заказ № ____

    Количество просмотров: 3732
    3 0
    Комментарии (0)
    • Никто ничего не написал...
    Отмена